close

Se connecter

Se connecter avec OpenID

ADN - cellbiochem.ca

IntégréTéléchargement
CHMI 2227F
Biochimie I
Acides nucléiques:
structure
- propriétés physico-chimiques
-
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
1
Acides nucléiques
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
2
Hershey et Chase
L’expérience du Waring blender…
32P
seulement dans les
acides nucléiques
35S
dans les protéines
seulement (Met/Cys)
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
3
Nature des acides nucléiques
1. bases azotées
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
4
Nature des acides nucléiques
2. sucres
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
5
Nature des acides nucléiques
3. nucléosides Lien
glycosidique
9
H
1
H
1’
Deoxyadenosine
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
1’
Cytidine
6
Nature des acides nucléiques
3. nucléosides
Purines
Base
DNA
RNA
Adénine
Déoxyadénosine
Adénosine
Guanine
Déoxyguanosine
Guanosine
Pyrimidines
Base
DNA
Cytosine
Thymine
Uracile
Déoxycytidine
RNA
Cytidine
Déoxythymidine
-
Uridine
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
7
Nature des acides nucléiques
3. nucléosides
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
8
Nature des acides nucléiques
4. nucléotides
Gamma
g
Beta
b
Alpha
a
Déoxythymidine 5’triphosphate
Guanosine 5’monophosphateCHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
9
Nature des acides nucléiques
4. nucléotides
Nombre de
groupes
phosphates
Déoxynucléotide/Nucléotide
1
Déoxyadenosine-5’-monophosphate
2
Déoxyguanosine-5’-diphosphate
3
Adénosine-5’-triphosphate
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
10
Nature des acides nucléiques
5. les polynucléotides
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
11
Nature des acides nucléiques
5. les polynucléotides
g
b
a
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
http://www.mbi.ufl.edu/facilities/msg/bch4024m/lecture45.pdf
12
Nature des acides nucléiques
6. Les règles de Chargaff
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
13
Structure des acides nucléiques
1. ADN
bases
Squelette sucre-phosphate
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
14
Structure des acides nucléiques
1. ADN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier,
1 Å Ph.D.
(Ångstrom)
15 m
= 0.1 nm = 1 x 10-10
Structure des acides nucléiques
1. ADN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
16
Structure des acides nucléiques
2. Duplex ARN/ARN et ADN/ARN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
17
Structure des acides nucléiques
2. Duplex ARN/ARN et ADN/ARN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
18
Structure des acides nucléiques

Java applets:
 http://www.moleculesinmotion.com/
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
19
ADN: Absorbance
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
20
Dénaturation de l’ADN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
21
Hyperchromicité
Dénaturation de l’ADN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
DNA#1
DNA#2
22
Dénaturation de l’ADN
G+C-rich
A+T-rich
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
23
Hybridation
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
24
Électrophorèse en gel d’agarose
ADN
-
Power
+
• L’agarose est un polymère poreux
qui permet le mouvement des
molécules d’ADN
Microscopie électronique à
balayage d’un gel d’agarose
(1×1 µm)

CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
25
Molécules d’ADN
De longueur connue
Électrophorèse en gel d’agarose
Staining with
ethidium bromide
Le bromure d’éthidium fluoresce rouge
seulement lorsqu’il s’intercale entre
les paires de bases.
Courbe standard: Log longueur
vs distance migrée
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
26
Analyse Southern et Northern
Hybridation
Une sonde d’acide
nucléique marquée au
32P n’est complémentaire qu’à une
seule des molécules
d’ADN présentes sur
le gel
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
27
Analyse Southern
ADN génomique coupé avec
Allèle différente des autres?
une enzyme de restriction CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
28
FISH
Fluorescent in-situ hybridization
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
29
Puces à ADN
RNA labeling
CHMI
2227 - E.R.
1000’s
ofGauthier,
genesPh.D.
30
Dénaturation de l’ADN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
31
Dénaturation de l’ADN
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
32
Le paradoxe de la valeur C
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
33
Le paradoxe de la valeur C
Mouche à fruits
Drosophila
melanogaster
180 Mb
Sauterelle
Podisma pedestris
18,000 Mb
kbp
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
34
Le paradoxe de la valeur C
Highly repeated
Moderately repeated
Single copy
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
35
Le génome humain
Génome humain
3000 Mb
Gènes et autres
séquences apparentées
ADN extra-génique
2100 Mb
900 Mb
ADN codant
ADN non-codant
ADN répété
90 Mb
810 Mb
420 Mb
ADN à copies
uniques/faible
nombre de copies
1680 Mb
Pseudogènes
Fragments
de gènes
Introns, etc
Répétitions
en tandem
ADN satellite
ADN
microsatellite
ADN
minisatellite
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
Répétitions
intercalées
(« interspersed »)
Éléments LTR
Éléments LINE
Éléments SINE
Transposons
36
Le génome humain
CHMI 2227 - E.R. Gauthier, Ph.D.
37
Auteur
Document
Catégorie
Uncategorized
Affichages
26
Taille du fichier
5 572 KB
Étiquettes
1/--Pages
signaler