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(Matériels indispensables au labo de bactériologie (Microbiologie).

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TD N°1
Matériels Indispensables
au Laboratoire
de Bactériologie
Introduction
La microbiologie est la science qui étudie les microorganismes. soit:
Certains eucaryotes
Champignons et certaines algues.
Protozoaires (êtres unicellulaires animaux).
Tous les procaryotes
Cyanophycées ou algues bleues .
Bactéries.
Les Virus
Les virus ne sont pas des micro-organismes car ils ne sont
pas autonomes, ils ne peuvent pas se reproduire sans
détourner la machinerie cellulaire d'un autre individu.
La microscopie
La microscopie est un ensemble de techniques
permettant d'obtenir une image des structures
biologiques.
Le microscope optique
Le microscope électronique
1. La microscopie optique
Le premier microscope fut sans doute fabriqué par Hans
et Zacharias Janssen, deux fabricants de lentilles
néerlandais, en 1590, mais le modèle final fut inventé par
Antoine van Leeuwenhœk en 1664, puis fut amélioré par
Christian Huygens.
La microscopie optique regroupe:
Le microscope à fond clair
Le microscope à fond noir
Le microscope à contraste de phase
Le microscope à fluorescence
1-1. La microscopie à fond clair
Utilise des rayons lumineux.
Permet le grossissement de 1500-2000 fois.
Épaisseur de coupe ( 1-5 µm).
Observation vitale et colorée.
Bactérie
Microscope à fond clair
Paramécie
1-2. La microscopie en contraste de phase
Cette technique permet d'observer les cellules sans
préparation ni coloration dans leur milieu d'origine.
A l’observation, on voit une image en noir et blanc où
les différentes structures apparaissent bordées de blanc
d’un côté et de noir de l’autre.
Culture cellulaire
1-3. La microscopie à fond noir
Utilise les rayons lumineux dans un fond noir.
Utilisé pour les éléments trop transparents.
Les éléments observés apparaissent très brillants
( les flagelles, les fibres ).
Bulles d'air dans l'eau
Le microscope à fond noir
1-4. La Microscopie à fluorescence
Consiste
à
utiliser
coloration fluorescente.
colorants très utilisés sont :
une
Deux
la rhodamine (émet une
lumière rouge) et la fluorescéine
(lumière verte).
Culture cellulaire
Le microscope à fluorescence
Legionella pneumophila
2. La microscopie électronique
Il existe deux variantes de la microscopie
électronique :
La microscopie à transmission
La microscopie à balayage
Le microscope électronique
à transmission
Bactériophage
Le microscope électronique
à balayage
Fournis des images en 3D
Bifidobacterium adolescentis
PSM
Poste de sécurité microbiologique
Définition
Un poste de sécurité microbiologique (PSM) est une
enceinte destinée à assurer la protection de l'utilisateur
et de l'environnement contre les dangers liés aux
aérosols dans la manipulation de micro-organismes
dangereux, l'air rejeté dans l'atmosphère étant filtré.
Selon la nature de la protection
Il existe trois (03 ) types de de PSM
TYPE I
TYPE II
TYPE III
SCHEMA DE PRINCIPE D’UN PSM TYPE II
PSM TYPE I
Selon la nature de la protection de :
manipulateur:
1.Par la création d’un flux
d’air entrant dans l’enceinte
De l’environnement
2. Par filtration de l’air de l’enceinte à
travers un filtre à très haute
efficacité(HEPA)
Du produit manipulé
Non protégé puisqu’on contacte avec
l’air du laboratoire
PSM :TYPE II
Selon la nature de la protection:
Du manipulateur
Par une aspiration créée au bord
avant du plan de travail (barrière
immatérielle entre lui et le produit
manipulé ).
De l’environnement
Par filtration de l’air de l’enceinte à
travers un filtre à très haute efficacité.
Du produit manipulé
Par un flux d’air descendant
préalablement filtré à travers un filtre
à très haute efficacité
PSM TYPE III
Selon la nature de la protection
manipulateur
Par une paroi matérielle ( le produit
et manipulé par l’intermédiaire de
manchons souples terminés par des
gants
l’environnement
Par filtration de l’air de l’enceinte à
travers deux filtres en série à très
haute efficacité
Du produit manipulé
Par absence de contact avec l’air du
laboratoire
Matériels de Biologie Moléculaire
Thermocycleur
•Le thermocycleur est composé de :
1. Bloc chauffant
2. Clavier pour la programmation des
cycles.
Utilisation : Amplification de l’ADN
Cuve pour électrophorèse
La cuve vertical ou horizontal d’électrophorèse est Composée de :
1- Générateur
2- Electrodes
SCAN GEL
UTILISATION :
•Pour visualiser le gel sous
les rayon ultra violet .
•Déterminer le nombre et
la taille des bandes d’ADN.
Pipette graduées
Pipette jaugées
Pipette pasteur
Cristallisoir
Flacon
Boite de pétri
Entonnoir
Dessiccateur
Tube à essai
Ballon
Erlenmeyer
Verre à pied
Becher
Éprouvette
Fiole
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